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          如何解決在攻擊菌制備過程中出現(xiàn)的問題

          時間:2019-05-14 10:19來源: 作者:班德液氮罐 點擊:
          用原來的傳代法制備的攻擊菌不但菌種的消費大,而且因傳代培養(yǎng)基的不同而各批間的效價檢測結(jié)果會有差異。而液氮保存攻擊菌解決了以上的問題。自增壓液氮罐

          試驗表明,將攻擊菌復(fù)蘇、傳代(3~9代)、分裝并保存在液氮中,攻擊菌仍然保持原有的生物學(xué)特性,符合《中華人民共和國藥典》〔K〕中攻擊菌的LD50為100~1000/MLD的要求,可用于無細(xì)胞百日咳效力檢定。

          且有較好的穩(wěn)定性,該法制備的攻擊菌用于檢定可減少人力、物力并節(jié)省時間,降低生產(chǎn)成本,提高工作效率,并能使每批的檢定結(jié)果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批制備的攻擊菌支間差異不顯著,從而更能準(zhǔn)確地反映制品的真實效價結(jié)果。

          在攻擊菌制備過程中,通過多次反復(fù)試驗取得了一些經(jīng)驗,現(xiàn)表述如下:

          1、在制備過程中攻擊菌的濃度測定非常重要,制備過程嚴(yán)格控制不受污染,而且必須純菌檢查合格;

          2、要注意在放入液氮前,一定要先緩凍,慢速冷卻會有充分的時間使細(xì)胞內(nèi)的水分向外滲出達(dá)到平衡,快速冷卻沒有充分的時間使細(xì)胞內(nèi)的水分向外滲出、脫水,加速細(xì)胞內(nèi)冰晶增大,使細(xì)胞處于損傷狀態(tài)或潛在的損傷狀態(tài);自增壓液氮罐

          3、快速加溫融化不會在解凍過程中其冰晶損傷細(xì)胞,因此解凍時一般在3 分鐘左右為宜。在生產(chǎn)實踐中需不斷積累經(jīng)驗、掌握操作技能,為提高制品質(zhì)量,在攻擊菌的應(yīng)用上尚有待進(jìn)一步改進(jìn)。
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